1、过程
(1)植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株)
第1步:原生质体的制备(酶解法)
第2步:原生质体的融合(物化法)
第3步:杂种细胞的筛选和培养
第4步:杂种植株鉴定
(2)动物细胞融合(单克隆抗体)
第1步:正常小鼠的处理(注射灭活抗原)
第2步:动物细胞融合(物化生法)
第3步:杂交瘤细胞的筛选和培养
第4步:提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)
2、原理/理论基础
(1)植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株):细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
(2)动物细胞融合(单克隆抗体):细胞膜的流动性、细胞增殖
3、融合前处理
(1)植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株):酶解法除去细胞壁:纤维素酶、果胶酶
(2)动物细胞融合(单克隆抗体):注射特定抗原免疫处理正常小鼠
4、促融因子
(1)植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株):
物理法:电激、离心、振动
化学法:聚乙二醇、等
(2)动物细胞融合(单克隆抗体):
物化法:与植物相同
生物法:灭活的仙台病毒
5、意义和用途
(1)植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株):
(1)克服远缘杂交不亲和的障碍
(2)克服有性杂交的母系遗传,获得细胞质基因的杂合子,是研究细胞质遗传的有力手段
(2)动物细胞融合(单克隆抗体):
有助于疾病的诊断、治疗、预防