1、直接分离法
(1)过程:供体细胞中的DNADNA片段受体细胞→DNA片段扩增目的基因细胞→目的基因。
(2)优点:操作简便
(3)缺点:工作量大,有盲目性,真核生物的目的基因含有不表达的核苷酸序列。
2、人工合成基因
a、反转录法
(1)过程:mRNA单链DNA双链DNA
(2)优点:专一性强,目的基因中不含内含子
(3)缺点:操作过程麻烦,mRNA生存时间短,技术要求高。
b、直接人工合成目的基因
(1)过程:从已知蛋白质的氨基酸序列,推测出目的基因的核苷酸序列,再通过化学方法直接合成目的基因。
(2)优点:专一性强,目的基因不含内含子,可合成自然界不存在的基因。
(3)缺点:目前,复杂的尚不知核苷酸序列的基因不能合成。